PCR實(shí)驗室設計及建設要求

PCR實(shí)驗指的是基因擴增實(shí)驗，其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加，是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗的常規方法，PCR實(shí)驗室廣泛應用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，博泰小編帶大家了解PCR實(shí)驗室設計及建設要求有哪些。

一、PCR實(shí)驗室布局

PCR實(shí)驗室原則上為試劑準備區，樣品制備區，擴增區和擴增產(chǎn)物分析區四個(gè)單獨的工作區域，并設有專(zhuān)用走廊，各工作區域應設緩沖間，工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區應是分隔獨立的，各工作區有明顯的標志，不能直通，如果緊密連接，需安裝物品傳遞窗。前兩區為擴增前區，后兩區為擴增后區。

二、實(shí)驗室各區功能及主要設備

1、試劑準備區：主要進(jìn)行試劑的制備，分裝和主反應混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應直接運送至該區域。試劑原材料必須貯存在本區內，并在本區內制備成所需的試劑。本區主要設備有天平，冰箱，離心機，加樣器，振蕩器等。

2、樣品制備區：主要進(jìn)行樣品的保存，核酸提取，貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區主要設備有冰箱，生物安全柜，離心機，加樣器，振蕩器等。本區的壓力梯度要求為：相對于鄰近區域為正壓，以避免從鄰近區進(jìn)入本區的氣溶膠污染，一般為+10Pa。

3、擴增區：主要進(jìn)行DNA擴增。此外，已制備的DNA模板的加入和主反應混合液制備成反應混合液等也可在本區內進(jìn)行。本區主要設備有：擴增儀，冰箱，離心機，加樣器等。本區的壓力梯度要求為：相對于鄰近區域為負壓，以避免氣溶從本區漏出一般為-25Pa。

4、擴增產(chǎn)物分析區：擴增產(chǎn)物的測定。本區主要設備有酶標儀，洗板機.加樣器和水浴箱等。本區的壓力梯度的要求為：相對于鄰近區域為負壓，一般為-25Pa，以避免擴增產(chǎn)物從本區擴散至其它區域。

三、PCR實(shí)驗室通風(fēng)系統及壓力控制

各區域之間應具備單間的實(shí)驗工藝流，物流，人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實(shí)驗室之間的相互干擾，防止氣溶膠擴散對實(shí)驗過(guò)程造成污染。PCR實(shí)驗室并沒(méi)有嚴格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗區域交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式，嚴格控制送，排風(fēng)的比例以保證個(gè)實(shí)驗區的壓力要求。

四、PCR實(shí)驗室裝飾

實(shí)驗室圍護結構應牢固，氣密性好；所有陰陽(yáng)角宜采用圓弧過(guò)度；墻體內壁光潔，不積塵，耐腐蝕，易清洗消毒；地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹(shù)脂自流坪，材料應滿(mǎn)足無(wú)縫隙，無(wú)滲漏，光潔，耐腐蝕的要求。

五、PCR實(shí)驗室注意事項

1、試劑準備區，樣品制備區設緊急洗眼器，以保證操作人員的安全。

2、幾個(gè)區域的大小設置情況，試劑準備區，擴增區，擴增產(chǎn)物分析區，空間可以相對小一些，樣品制備區要放置生物安全柜和低溫冰箱，空間應大一些。